普析液相色譜儀的工作原理:
系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過(guò)程,各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過(guò)檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)主要有進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
普析液相色譜儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
以液體作為流動(dòng)相的色譜分離方法;
流動(dòng)相具有運(yùn)載樣品分子和選擇性分離的雙重作用;
適用于高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差的大分子化合物(常溫進(jìn)樣不破壞藥物中的大分子化合物);
色譜柱類(lèi)型,流動(dòng)相比例,操作參數(shù)(柱溫,流動(dòng)相梯度)可優(yōu)化分離效果。
普析液相色譜儀的開(kāi)機(jī)順序:
1.檢查溶劑托盤(pán)托盤(pán)上的溶劑是否足量,以溶劑液面超過(guò)過(guò)輸液管過(guò)濾頭5厘米以上為宜。2.檢查輸液管內(nèi)部有否氣泡,若有,應(yīng)及時(shí)通過(guò)排液閥排出。
3.對(duì)溶劑(針對(duì)第1項(xiàng)看是否需要補(bǔ)充溶劑)和樣品進(jìn)行處理,過(guò)濾,脫氣。
4.打開(kāi)主機(jī)電源,依次打開(kāi)檢測(cè)器,泵A,泵B,柱箱的電源。
5.打開(kāi)電腦,開(kāi)啟色譜工作站。
6.先在工作站中開(kāi)啟活塞泵,以所需的流動(dòng)相平衡系統(tǒng)。
7.打開(kāi)氘燈,等待系統(tǒng)基線(xiàn)走穩(wěn)。
8.開(kāi)始進(jìn)樣檢測(cè)。