普析紫外可見分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室中常用的一種分析儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、醫(yī)學(xué)、環(huán)境等領(lǐng)域。為了確保儀器的測(cè)量準(zhǔn)確性和可靠性,定期進(jìn)行校準(zhǔn)和驗(yàn)證是至關(guān)重要的。
一、校準(zhǔn)方法
1、波長(zhǎng)校準(zhǔn):波長(zhǎng)校準(zhǔn)是確保儀器測(cè)量波長(zhǎng)準(zhǔn)確性的關(guān)鍵步驟。通常使用汞燈或氘燈作為光源,通過觀察特定波長(zhǎng)下的吸收峰來進(jìn)行校準(zhǔn)。具體步驟如下:
將儀器設(shè)定在特定波長(zhǎng)。
放置校準(zhǔn)燈,調(diào)整光路使其通過樣品池。
觀察吸收峰,記錄實(shí)際波長(zhǎng)值。
2、吸光度校準(zhǔn):吸光度校準(zhǔn)通常使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行。具體步驟如下:
準(zhǔn)備一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
將每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液依次放入樣品池中,測(cè)量其吸光度。
將測(cè)得的吸光度值與理論值進(jìn)行比較,計(jì)算相對(duì)誤差。
3、基線校準(zhǔn):基線校準(zhǔn)用于消除背景干擾,確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。具體步驟如下:
使用空白溶劑作為參比,測(cè)量其吸光度。
調(diào)整儀器的基線調(diào)節(jié)裝置,使空白溶劑的吸光度值為零。
重復(fù)測(cè)量幾次,確保基線穩(wěn)定。
二、驗(yàn)證方法
1、精度驗(yàn)證:精度驗(yàn)證用于評(píng)估儀器測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性。具體步驟如下:
準(zhǔn)備一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
分別測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,計(jì)算其平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。
計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,評(píng)估儀器的精度。
2、重復(fù)性驗(yàn)證:重復(fù)性驗(yàn)證用于評(píng)估儀器在同一條件下多次測(cè)量結(jié)果的一致性。具體步驟如下:
使用同一標(biāo)準(zhǔn)溶液,連續(xù)測(cè)量多次。
計(jì)算每次測(cè)量的吸光度值,求其平均值和標(biāo)準(zhǔn)偏差。
計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,評(píng)估儀器的重復(fù)性。
3、線性驗(yàn)證:線性驗(yàn)證用于評(píng)估儀器在一定濃度范圍內(nèi)測(cè)量結(jié)果的線性關(guān)系。具體步驟如下:
準(zhǔn)備一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
分別測(cè)量每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,繪制吸光度-濃度曲線。
計(jì)算曲線的線性相關(guān)系數(shù),評(píng)估儀器的線性。
三、注意事項(xiàng)
校準(zhǔn)頻率:建議每年至少進(jìn)行一次全面的校準(zhǔn)和驗(yàn)證,對(duì)于使用頻繁或環(huán)境較差的儀器,可適當(dāng)增加校準(zhǔn)頻率。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì):使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行校準(zhǔn)和驗(yàn)證,以確保測(cè)量結(jié)果的溯源性。
環(huán)境條件:在校準(zhǔn)和驗(yàn)證過程中,確保環(huán)境溫度、濕度、振動(dòng)等條件符合儀器的要求,避免外界干擾。